Определен новый белок-мишень для выявления рака толстой кишки

Колоректальный рак (КРР) является третьим наиболее часто диагностируемым онкологическим заболеванием и третьей ведущей причиной смертности от рака у мужчин и женщин в США. Патогенные переносчики, которые регулируют опухолевый генез КРР, могли бы стать подходящими биомаркерами для предсказания прогноза лечения, рецидива заболевания и реакции на терапию, что позволит улучшить лечение пациентов с КРР.

Лечение КРР становится все более персонализированным и определяется сочетанием клинических, опухолевых и молекулярных характеристик. Протоонкоген β-катенин вызывает онкогенез колоректального рака, Casitas B-lineage lymphoma (c-Cbl) замедляет рост опухоли КРР путем направления ядерного β-катенина с помощью слабоизученного механизма. Кроме того, роль c-Cbl в КРР человека также остается в значительной степени недостаточно изученной.

Ученые из Школы медицины Бостонского университета (Бостон, штат Массачусетс, США) оценили ретроспективное одноцентровое наблюдательное когортное исследование 72 пациентов с IV стадией КРР на основании доступных образцов опухолевых тканей для анализа; отобранные пациенты проходили лечение в период с 1 января 2004 года до 31 декабря 2014 года. Команда получила неокрашенные 6-миллиметровые парафинированные срезы, которые были обработаны и исследованы. Для оценки экспрессии c-Cbl в образцах КРР человека был разработан процесс сегментации окрашенных изображений.

Ученые использовали в своих исследованиях вестерн-блоттинг, клеточную культуру, антитела, in vitro анализ ангиогенеза, анализ убиквитинирования, иммуноферментный анализ для фактора роста эндотелия сосудов (VEGF), а также анализ образования сфероидов. Мини-набор RNeasy использовался для экстракции полной РНК из клеток НТ-29, которые выделяли различные структуры. Исследователи использовали набор обратной транскрипции Qiagen Sensiscript, а затем RT-PCR с применением предварительно проверенных праймеров от человека AXIN2, MYC и VEGF, а также SYBRgreen.

Команда использовала новый количественный гистопатологический метод, чтобы продемонстрировать, что пациенты с опухолями, экспрессирующими высокие уровни c-Cbl, имели значительно лучшую медианную выживаемость (3,7 года), по сравнению с низкими показателями экспрессирования c-Cbl (1,8 года), а также, по сравнению с такими показателями, имели более чем в два раза большую вероятность выжить в течение трех лет. Было продемонстрировано, что регулирование посредством c-Cbl ядерного β-катенина требует фосфорилирования c-Cbl Tyr371, поскольку его мутация ставит под угрозу его способность нацеливаться на β-катенин. Мутантная форма тирозина 371 (Y371H) взаимодействовала с ядерным β-катенином, но не смогла его убиквитинировать. Ядерная локализация мутантного c-Cbl-Y371H способствовала его доминирующему отрицательному воздействию на ядерный β-катенин.

Авторы пришли к выводу, что ассоциация опухолевых уровней c-Cbl и общей выживаемости пациентов с метастатическим КРК усиливает роль c-Cbl как отрицательного регулятора роста опухоли КРК. Эти данные демонстрируют передачу сигналов Wnt/β-катенина как потенциального медиатора последующих эффектов CBL-мутации при c.1111T> C (p.371Y> H) и подтверждают наличие молекулярных особенностей c-Cbl, которые имеют решающее значение для его воздействия на ядерный β-катенин. Исследование было опубликовано 17 июля 2018 года в American Journal of Pathology.

Ссылки по теме:
Boston University School of Medicine