Для обнаружения вируса чикунгунья разработан простой и недорогой диагностический комплект

Чикунгунья, заболевание, переносимое комарами, которое хотя и не часто приводит к смертельному исходу, вызывает сильную боль в суставах, приводящую к потере трудоспособности, распространяется по всему миру и может быть трудно диагностируемым, а большинство из сложных в разработке тестов в настоящее время являются дорогостоящими.

Был разработан инновационный метод для выработки антигенов альфавирусов для использования в диагностическом испытании, что приводит к уменьшению уровня сложности производства, а также к улучшению чувствительности при практическом использовании. Природа этих химерных вирусов, специфичная для насекомых, приводит к желательному профилю безопасности и создает возможность для надёжной работы с антигеном.

Ученые из Медицинского отделения Университета штата Техас (Галвестон, штат Техас, США) и их коллеги смогли использовать другой передаваемый комарами вирус, который остался практически неизвестным и неизученным, чтобы создать новый тест, который мог помочь врачам и исследователям диагностировать и отслеживать распространение чикунгунья. Ранее неизвестный вирус, названный в настоящее время вирусом Эйлат (Eilat virus), является близким к вирусу чикунгунья и другим вирусам, передаваемым через укусы комаров, и был обнаружен в израильской Пустыне Негев приблизительно три десятилетия назад. Вирус будет размножаться только среди комаров, что делает его безопасным для людей и других позвоночных животных.

Команда ученых, в сотрудничестве с частной коммерческой лабораторией InBios International (Сиэтл, штат Вашингтон, США), использовала химерные частицы вируса Эйлат, чтобы создать безопасный и простой в использовании диагностический тест. Специалисты сферы здравоохранения могут взять образец сыворотки крови у людей с подозрением на заражение вирусом чикунгунья и, используя комплект для диагностического обследования, созданный совместно с InBios, получить результат меньше чем через два часа. Чтобы выполнить обнаружение иммуноглобулина класса М (IgM) для положительных контрольных образцов, проверенных методом твердофазного иммуноферментного анализа (ELISA), была использована панель из пяти IgM/ELISA и сыворотка крови с положительным результатом реакции нейтрализации бляшкообразования, полученная от выздоравливающих пациентов, диагностированных методом ПЦР с обратной транскриптазой. Восемь образцов сыворотки крови человека, положительных или на вирус денге, или на вирус венесуэльского энцефалита лошадей, но отрицательных на вирус чикунгунья, определенные с помощью реакции торможения гемагглютинации, использовались в качестве отрицательных контрольных образцов. Значения абсорбционной способности для образцов ELISA были считаны при длине волны 450 нм на регулируемом микропланшетном ридере VERSAmax (компания Molecular Devices; Саннивейл, штат Калифорния, США).

Антитела иммуноглобулина класса M к вирусу чикунгунья были без промедления обнаружены со значениями оптической плотности в пределах от 0.23 до 3.0, тогда как у представителей контрольной группы среднее значение оптической плотности составляло 0.09. Ученые смогли продемонстрировать, что вирус Эйлат/вирус Чикунгунья имеют высокие титры в клетках насекомого и могут быть применены непосредственно в твердофазных иммуноферментных анализах без инактивации, приводя к очень чувствительной диагностике недавней и прошедшей инфекции, вызванной вирусом чикунгунья, и превосходят традиционные методы подготовки антигенов. Они также смогли показать, что разработанные антитела иммуноглобулина класса M к вирусу чикунгунья и метод твердофазного иммуноферментного анализа для определения IgG могут различить у людей инфекции, вызванные вирусом чикунгунья и вирусом венесуэльского энцефалита лошадей или вирусом денге, с высокой степенью разделения сигналов. Исследование было опубликовано 22 октября 2015 года в журнале Public Library of Science Neglected Tropical Diseases.

Ссылки по теме:
University of Texas Medical Branch
InBios International
Molecular Devices