LabMedica

Download Mobile App
Recent News Expo Clinical Chem. Molecular Diagnostics Hematology Immunology Microbiology Pathology Technology Industry Focus

Высокочувствительный анализ на основе микрожидкостной хроматографии и тандемной масс-спектрометрии разработан для определения эстрадиола в сыворотке крови

By LabMedica International staff writers
Posted on 12 Aug 2016
Print article
Система Eksigent Ekspert micro LC 200 для выполнения микрожидкостной хроматографии (фото любезно предоставлено компанией Sciex).
Система Eksigent Ekspert micro LC 200 для выполнения микрожидкостной хроматографии (фото любезно предоставлено компанией Sciex).
Существуют ощутимые потребности в точном измерении низких концентраций эстрадиола (E2), составляющих менее 20 пг/мл, у женщин в постменопаузальный период, мужчин, пациентов детского возраста и пациентов, проходящих лечение рака молочной железы.

Автоматизированные методы иммунологического анализа являются наиболее широко используемыми методами для измерений E2 в клинических лабораториях; однако им недостает точности и точности измерения при низких физиологических концентрациях E2. На основе микрожидкостной хроматографии – тандемной масс-спектрометрии (micro LC-MS/MS) был разработан высокочувствительный метод без дериватизации, чтобы достоверно измерять концентрации E2 ниже 5 пг/мл с использованием небольшого объема пробы.

Ученые из Чикагского университета (штат Иллинойс, США) использовали образцы для сравнения методов из оставшихся образцов, доставленных из лаборатории клинической химии. В общей сложности 290 мкл образца было смешано с внутренним стандартом, E2-d4, и извлечено со смесью гексана/этилацетата (процентное соотношение объёмов 90/10). После извлечения образец был отделен с помощью системы Eksigent Ekspert micro LC 200 с расходом жидкости, равным 35 мкл/мин. при полном времени пробега, равном 3.5 минут, и обнаружен с помощью масс-спектрометра QTRAP 6500 (Sciex, Фрамингем, штат Массачусетс, США) в режиме отрицательной ионизации, используя переходы: 271/145 (квантификатор) и 271/143 (квалификатор). В этом методе было крайне важно использовать колонки для проведения жидкостной хроматографии высокого давления, имеющие стабильность при pH >10.

Измерения E2, выполненные с помощью микрожидкостной хроматографии и тандемной масс-спектрометрии, сравнили с автоматизированным методом иммунологического анализа Cobas 8000 E2 II (компания Roche Diagnostics, Базель, Швейцария), используя 42 образца плазмы крови, собранных в пробирки с литий-гепарином, и с разработанным в лаборатории непрямым радиоиммунологическим анализом, используя 38 образцов сыворотки крови, собранных в обычные сывороточные пробирки. Метод микрожидкостной хроматографии и тандемной масс-спектрометрии показал хорошую корреляцию с радиоиммунологическим анализом и невысокую корреляцию с автоматизированным методом иммунологического анализа E2 Roche Cobas. Валидационное исследование показало широкие линейные диапазоны от 3.0 до 820 пг/мл. Итоговая точность измерений была ниже 15% на всех уровнях контроля качества, и нижняя граница определяемых концентраций составляла 3.0 пг/мл. Исследование было опубликовано в выпуске журнала Journal of Applied Laboratory Medicine за июль 2016 года.

Ссылки по теме:
University of Chicago
Sciex
Roche Diagnostics


Gold Member
Pharmacogenetics Panel
VeriDose Core Panel v2.0
Verification Panels for Assay Development & QC
Seroconversion Panels
New
TORCH Infections Test
TORCH Panel
New
Silver Member
ACTH Assay
ACTH ELISA

Print article

Channels

Clinical Chemistry

view channel
Image: The tiny clay-based materials can be customized for a range of medical applications (Photo courtesy of Angira Roy and Sam O’Keefe)

‘Brilliantly Luminous’ Nanoscale Chemical Tool to Improve Disease Detection

Thousands of commercially available glowing molecules known as fluorophores are commonly used in medical imaging, disease detection, biomarker tagging, and chemical analysis. They are also integral in... Read more

Immunology

view channel
Image: The cancer stem cell test can accurately choose more effective treatments (Photo courtesy of University of Cincinnati)

Stem Cell Test Predicts Treatment Outcome for Patients with Platinum-Resistant Ovarian Cancer

Epithelial ovarian cancer frequently responds to chemotherapy initially, but eventually, the tumor develops resistance to the therapy, leading to regrowth. This resistance is partially due to the activation... Read more

Microbiology

view channel
Image: The lab-in-tube assay could improve TB diagnoses in rural or resource-limited areas (Photo courtesy of Kenny Lass/Tulane University)

Handheld Device Delivers Low-Cost TB Results in Less Than One Hour

Tuberculosis (TB) remains the deadliest infectious disease globally, affecting an estimated 10 million people annually. In 2021, about 4.2 million TB cases went undiagnosed or unreported, mainly due to... Read more

Pathology

view channel
Image: The ready-to-use DUB enzyme assay kits accelerate routine DUB activity assays without compromising data quality (Photo courtesy of Adobe Stock)

Sensitive and Specific DUB Enzyme Assay Kits Require Minimal Setup Without Substrate Preparation

Ubiquitination and deubiquitination are two important physiological processes in the ubiquitin-proteasome system, responsible for protein degradation in cells. Deubiquitinating (DUB) enzymes contain around... Read more

Technology

view channel
Image: The HIV-1 self-testing chip will be capable of selectively detecting HIV in whole blood samples (Photo courtesy of Shutterstock)

Disposable Microchip Technology Could Selectively Detect HIV in Whole Blood Samples

As of the end of 2023, approximately 40 million people globally were living with HIV, and around 630,000 individuals died from AIDS-related illnesses that same year. Despite a substantial decline in deaths... Read more

Industry

view channel
Image: The collaboration aims to leverage Oxford Nanopore\'s sequencing platform and Cepheid\'s GeneXpert system to advance the field of sequencing for infectious diseases (Photo courtesy of Cepheid)

Cepheid and Oxford Nanopore Technologies Partner on Advancing Automated Sequencing-Based Solutions

Cepheid (Sunnyvale, CA, USA), a leading molecular diagnostics company, and Oxford Nanopore Technologies (Oxford, UK), the company behind a new generation of sequencing-based molecular analysis technologies,... Read more
Sekisui Diagnostics UK Ltd.