经验证的人类精浆果糖测定法

By LabMedica International staff writers
Posted on 21 Sep 2016

人类精液由男性生殖器官分泌，包含精细胞和精浆（SP），是由睾丸、前列腺和附属腺分泌的一种混合物，为射精功能提供生化支持。
因此，评估人精液的质量及其生育能力不仅需要定性和定量分析精子，还需要对SP进行生化分析。已开发一种快速、简便、专属性和定量精液果糖光度测定法，使用己糖激酶和磷酸葡萄糖异构酶进行检测，由一种半自动双色分析仪完成测定。

图片：AU 400全自动、随机存取的临床化学分析仪（照片由Olympus提供）。

Merkur University Hospital（Zagreb，Croatia）的医学生物化学家使用剩余的精液样品进行分析，这些精液样品来自接受常规生育评估的28岁至41岁男性，他们的精液参数正常。目前没有可用的精液质量控制商品，因此使用两个内部SP池进行内部质量控制，获得正常和病理值的变异系数分别为0.85%和1.06%。本研究旨在证实Beckman Coulter（BC）AU400分析仪（Olympus Mishima，Sunto-gun，Japan）进行酶法检测SP果糖的性能，以及使用此方法进行精液质量分析面临的挑战。
使用酶法测定SP果糖，由葡萄糖间接进行检测。由己糖激酶进行果糖磷酸化后，果糖-6-磷酸经磷酸葡萄糖异构酶作用转化为葡萄糖-6-磷酸。由葡萄糖-6-磷酸脱氢酶进一步氧化葡萄糖-6-磷酸，得到6-磷酸葡萄糖和烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NADH）。形成的NADH量由D-果糖和D-葡萄糖化学计量，因此检测出的NADH形成量定量反应了葡萄糖的量，与SP果糖的量相等。
此方法首次比较了43份SP样品，线性范围0.37-24.7 mmol/L。还检测了来自无生育问题的健康志愿者的20份SP样品中的果糖，以确认此前确立的参考间期8.3-27.8 mmol/L。所有检测的样品在参考间期内，结果为8.8-23.6 mmol/L。
作者们得出结论，此验证研究的结果显示，使用BC AU400分析仪分析SP果糖的自动酶测定法符合依据ISO 15189标准评审所需的质量标准和要求，因此为临床评估男性生育能力提供了一种可靠的诊断方法。本研究发表于2016年7月刊的Journal of Applied Laboratory Medicine（应用实验室医学杂志）。

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Merkur University Hospital
Olympus Mishima