Неактивные диссеминированные опухолевые клетки стратифицированы у пациентов с раком молочной железы

У пациентов с раком молочной железы может наступить рецидив и последующая смерть по причине болезни через много лет после первичного лечения. Это указывает на способность клеток бессимптомного рака выживать в непролиферирующем или медленно пролиферирующем состоянии, сохраняя потенциал для прогрессирования и пролиферации в более поздний момент времени.

Наличие диссеминированных опухолевых клеток (ДОК) в костном мозге (КМ) является независимым прогностическим фактором раннего рака молочной железы, но не дает единообразного прогноза результата. Опухолевые клетки могут сохраняться в состоянии покоя с течением времени, однако клинические исследования маркеров, предсказывающие возможность пробуждения ДОК, отсутствуют.


Ученые из Университетской больницы Осло (Осло, Норвегия) и их коллеги из Института рака Тиша (Tisch Cancer Institute, Нью-Йорк, штат Нью-Йорк, США) проанализировали экспрессию белка подсемейства ядерного рецептора 2, группа F, элемент 1 (NR2F1) в ДОК с помощью двойного иммунофлюоресцентного окрашивания (ДИФ) дополнительных цитоспинов, полученных из 114 образцов КМ у 86 выбранных пациенток, имеющих рак молочной железы с положительным диагнозом ДОК. NR2F1 является орфанным ядерным рецептором из семейства рецепторов ретиноевой кислоты.

Костный мозг аспирировали в гепарине и разделяли центрифугированием в градиенте плотности с использованием раствора Lymphoprep. Мононуклеарные клетки (МНК) собирали из межфазного слоя, промывали в 1%-ной фетальной телячьей сыворотке в PBS и ресуспендировали до 1×106 клеток/мл. Мазки-цитоспины (cytospins) были подготовлены посредством центрифугирования МНК КМ до состояния покрытых поли-L-лизином стеклянных слайдов (5×105 МНК/слайд) в цитоцентрифуге, просушивались на воздухе при комнатной температуре в течение ночи и хранились при -80° C до иммуноокрашивания. Двойное иммунофлюоресцентное окрашивание было проведено с использованием моноклональных антител AE1/AE3 широкого спектра анти-цитокератинов (анти-ЦК) в сочетании с анти-COUP TF1/NR2F1 на предмет экспрессии в состоянии покоя.

Команда обнаружила, что пациенты вскоре умирали, когда клетки из исходной опухоли пациента с раком молочной железы метастазировали в костный мозг пациента, в котором нет или имеется только небольшое количество белка NR2F1. Однако у пациентов с высокой концентрацией NR2F1 в раковых клетках их костного мозга данный тип метастатического рака развивался редко и жили они дольше. Наличие высокой концентрации NR2F1 инициировало состояние покоя раковых клеток, по существу дезактивировало их, поэтому это исследование показывает, что выживаемость у этих пациентов обусловлена покоем диссеминированных раковых клеток.

Хулио А. Агирре-Гисо (Julio A. Aguirre-Ghiso), доктор философии, профессор онкологических наук и ведущий автор исследования, говорит: “Исследование показывает, что преимущество в выживаемости у таких пациентов связано с высокими уровнями этого белка. Тесты с использованием данного белкового маркера могли бы дополнительно улучшить лечение рака молочной железы, избавляя пациентов от ненужного лечения. Идентификация пациентов с диссеминированным заболеванием, которое еще не является симптоматичным, и его характеризация на предмет потенциального покоя или метастатического рецидива – это прорыв”. Исследование было опубликовано 16 октября 2018 года в журнале Breast Cancer Research.

Ссылки по теме:
University Hospital Oslo
Tisch Cancer Institute