Генетическая мутация вызывает у младенцев заболевание, приводящее к летальному исходу

Энтеропатия с потерей белка представляет собой заболевание желудочно-кишечного тракта, которое приводит к потере белка, к сильному увеличению размеров живота, недостаточности или нарушению питания и ранней смерти младенцев, страдающих этим недугом.

Полноэкзомное секвенирование использовалось для определения нонсенс-мутации в гене, который кодирует мембранный белок PLVAP (plasmalemma vesicle-associated protein), приводящий к особо серьезной форме энтеропатии с потерей белка, характеризующейся гиперпротеинемией, гипоальбуминемией и гипертриглицеридемией.


Ученые из Hospital for Sick Children (Торонто, провинция Онтарио, Канада) получили образцы от пациента с мутацией PLVAP p.Arg358* при двух отборах проб во время эндоскопического исследования на присутствие серьезной формы энтеропатии с потерей белка. Контрольные образцы, взятые из двенадцатиперстной кишки или толстой кишки, были получены от пациентов, которые проходили диагностику желудочно-кишечных симптомов, при этом результаты эндоскопических и гистологических исследований у них были в норме, как и состояние при последующих клинических наблюдениях.

Было выполнено полноэкзомное секвенирование, и составление экзомной библиотеки осуществлялось с использованием комплекта Ion Torrent AmpliSeq RDY Exome Kit (Life Technologies; Карлсбад, штат Калифорния, США); ДНК была количественно определена с помощью теста для высокочувствительного определения Qubit DNA HS assay или теста Qubit DNA BR assay для определения в широком диапазоне (Life Technologies). Количественное определение библиотек выполнялось с помощью количественной полимеразной цепной реакции (ПЦР), осуществлялось секвенирование на ионно-протонном секвенаторе Ion Torrent с использованием чипа PI V2. Исследователи применили множество методов в своей работе, включая проточную цитометрию со считыванием на приборе FACSCalibur (компания BD Biosciences; Сан-Хосе, штат Калифорния, США), конфокальную микроскопию, результаты гистологического исследования и иммунофлюоресценцию.

Патология, вызванная мутациями в PLVAP, происходила из-за повышенного истечения из малых кровеносных сосудов, а не из-за активной потери белка из клеток, выстилающих кишечник. Это открытие отличается от большинства случаев энтеропатии, включая врождённую атрофию микроворсинок и интестинальную эпителиальную дисплазию, которые поражают маленьких детей. В этих последних заболеваниях генетические аномалии вызывают клеточные нарушения, прежде всего затрагивающие структуру и функционирование эпителиальной ткани кишечника.

Абдул Элькадри (Abdul Elkadri), ведущий автор исследования, сказал: “Эти результаты появились в критическое время медицинской науки; новая перспектива генной терапии может сделать возможной направленную коррекцию мутаций PLVAP. Тем временем мы можем использовать эти результаты для разработки более быстрых стратегий диагностики, чтобы проверить младенцев на данную генетическую мутацию и предотвратить серьезные осложнения на ранней стадии болезни”. Исследование было опубликовано в номере журнала Cellular and Molecular Gastroenterology and Hepatology за июль 2015 года.

Ссылки по теме:
Hospital for Sick Children
Life Technologies
Agencourt Bioscience