用新颖的分子工具检测无症状的疟疾感染者

By LabMedica International staff writers
Posted on 18 Jan 2016

已减少局部扩散和获取杀灭前状态为目的的疟疾控制计划要求正确检测发热病人和无症状携带者外周血中的疟原虫。

无症状携带者是促进寄生虫传播的源头，他们体内的寄生虫密度一般比有症状者低得多，检测阈值为200条寄生虫/微升，在这个值以下显微镜检和快速诊断检验(RDT)等标准诊断工具会变得不太可靠。

图片A：96孔微孔板里的环介导恒温扩增(LAMP)反应的图示显示出阳性样本和阴性样本的颜色不同（图片蒙冈比亚医学研究理事会惠赐）。

图片B：用于检测恶性疟原虫的SD Bioline疟疾抗原P.f快速诊断检验(RDT)（图片蒙标准诊断公司惠赐）。

冈比亚Banjul的医学研究理事会的科学家率领一个合作团队采集了341名受试者的血液筛查疟疾，他们的年龄中值是9岁（范围是1到68岁）。用一次针刺指尖采集的血制成三份血样，分别用于RDT、厚血膜(TBF)和干血斑(DBS)。在现场立即读取RDT结果，而每天结束时把DBS和显微镜涂片送到现场工作站做进一步处理。环介导恒温扩增(LAMP)这种新颖的分子工具靶向恶性疟原虫的质体样细胞器基因组，科学家评估了它检测无症状疟疾感染者的效果。

LAMP检测到恶性疟原虫的发生率为37 % (127/341)，显微镜检的检验结果为30 % (104/341)，韩国龙仁市标准诊断股份有限公司(www.standardia.com)的SD Bioline疟疾抗原P.f RDT检测到的恶性疟原虫发生率为37 % (126/341)。以聚合酶链反应(PCR)法为参照，LAMP的灵敏度为92 %，显微镜检的灵敏度为78 %，RDT的灵敏度为76 %；LAMP的特异性为97 %，显微镜检的特异性为99 %，RDT的特异性为88 %。整个LAMP测定的运行时间大约是三个半小时，每天平均收集27 ± 9.5份样本，而RDT的每个操作员每小时最少收集10份样本，显微镜检的总时长超过八小时。

该研究的论文发表于2015年10月9日的《疟疾杂志》(Malaria Journal)。作者总结说，LAMP的运行时间更短，通量高，所以获得结果的速度比显微镜检快得多，且比RDT更可靠，这表明这种诊断检验适合做大规模筛查与治疗(MSAT)或集中筛查与治疗(FSAT)。这款新型LAMP测定靶向的质体样细胞器基因组是寄生虫独有的，因此可确保高特异性。

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