Новый молекулярный инструмент обнаруживает клинически здоровых людей, зараженных малярией

Программы по контролю за малярией ставят своей целью снижение локального распространения инфекции и достижение состояния предустранения, что требует надежного обнаружения паразитирующего организма плазмодия в периферической крови как у больных с лихорадкой, так и у бессимптомных носителей.

Бессимптомные носители, представляющие источник заражения человека, способствующий распространению паразитирующих организмов, обычно имеют намного более низкие удельные массы паразитирующих организмов по сравнению с людьми, имеющими клинические проявления заболевания. Такие пороги обнаружения составляют меньше чем 200 паразитирующих организмов/мкл, в этом случае стандартные средства диагностики, такие как микроскопическое исследование и диагностические экспресс-тесты, становятся менее надежными.


Команда ученых в сотрудничестве с коллегами из Медицинского исследовательского совета (Банжул, Гамбия) взяла кровь у 341 пациента, со средним возрастом 9 лет (диапазон от 1 года до 68 лет), и выполнила проверку на малярию. Из одной пробы крови, взятой из пальца, образцы направлялись на проведение диагностического экспресс-теста, исследования толстой капли крови и сухой капли крови. Получение данных диагностических экспресс-тестов было проведено сразу же на месте выполнения, в то время как образцы сухой капли крови и предметные стекла с образцами для микроскопического исследования отправлялись на станцию анализа проб в конце каждого дня для последующего исследования. Новый молекулярный инструмент, петлевая изотермическая амплификация (loop-mediated isothermal amplification, или LAMP), нацеленная на геном апикопласта Plasmodium falciparum, был оценен для обнаружения клинически здоровых людей, зараженных малярией.

Уровень распространения малярии, вызванной паразитирующим организмом P. falciparum, обнаруженный с использованием метода LAMP, составлял 37% (127/341), с помощью микроскопического исследования – 30 % (104/341) и 37 % (126/341) – с применением диагностического экспресс-теста SD Bioline Malaria Antigen P.f (Standard Diagnostics, Inc.; Йонгин, Республика Корея). По сравнению с эталонным методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) чувствительность метода LAMP составляла 92%, микроскопического исследования – 78% и диагностического экспресс-теста – 76%; специфичность составляла 97% для метода LAMP, 99% - для микроскопического исследования и 88% - для диагностического экспресс-теста. Время выполнения всего анализа LAMP составляло приблизительно три часа и 30 минут для среднего числа образцов, собранных за день, равного 27 ± 9.5, по сравнению с минимум 10 образцами в час на оператора при использовании диагностического экспресс-теста и более 8 часами для микроскопического исследования.

Авторы пришли к заключению, что результаты при использовании метода LAMP, с более коротким временем выполнения и высокой пропускной способностью при обработке, будут получены намного быстрее, чем при микроскопическом исследовании, и будут более достоверными, чем при применении диагностического экспресс-теста. Это поддержит использование данного диагностического теста для мероприятий массового скрининга и лечения или целенаправленного скрининга и лечения. Геном апикопласта, на который нацелен новый метод LAMP, является уникальным для данного паразитирующего организма, таким образом гарантируется высокая специфичность. Исследование было опубликовано 9 октября 2015 года в журнале Malaria Journal.

Ссылки по теме:
Medical Research Council Unit
Standard Diagnostics