鉴定骨髓涂片中病原体的新方法

By LabMedica International staff writers
Posted on 11 Aug 2015

快速鉴定四种病原体并早期诊断四种不同的疾病至关重要；然而瑞氏-吉姆萨复合染色的骨髓涂片里一些病原体的尺寸和形状类似。

新发明的一种方法能快速鉴定骨髓涂片中的马尔尼菲青霉菌、荚膜组织胞浆菌、毛霉菌和杜氏利什曼原虫，这些病原体分别导致马尔尼菲青霉病、组织胞浆菌病、毛霉菌病和利什曼病。

图片：骨髓穿刺显示荚膜组织胞浆菌(A)和过碘酸雪夫氏试剂染色的酵母菌(B)（图片蒙Gareth Gregory和Rose Linda惠赐）。

广西医科大学的临床化验学家获取了55份受感染的骨髓涂片(BMS)。其中25份感染了马尔尼菲青霉菌，10份感染了荚膜组织胞浆菌，3份感染了毛霉菌，17份感染了杜氏利什曼原虫。通过病原体培养物确诊了四种疾病。用95%的酒精固定每份BMS 10分钟，然后洗净、干燥，再用1%的过碘酸染色20分钟，再一次清洗和干燥。然后用雪夫氏试剂对每份BMS染色60分钟，清洗并干燥，然后用苏木精染色5分钟，清洗并干燥。用光学显微镜观察BMS。再按标准程序进行瑞氏-吉姆萨复合染色。

瑞氏-吉姆萨复合染色的四种病原体大小差不多，主要存在于巨噬细胞中。正在复制的马尔尼菲青霉菌有两个细胞核，分别位于菌体两侧，中间有薄隔膜。荚膜组织胞浆菌有一个紫色的细胞核，占据孢子三分之一到二分之一的位置。细胞质是浅蓝色。观察到的外围孢子是一个空的无色亮环，就像一个胶囊。

一般观察到毛霉菌有一条狭长的浅染色区，这可能与瑞氏染色的双核马尔尼菲青霉菌混淆。杜氏利什曼原虫的细胞核旁有一个深染色的动基体。在过碘酸雪夫氏试剂(PAS)染色时，马尔尼菲青霉菌和荚膜组织胞浆菌很清楚，它们变成红色。

该研究的论文发表于2015年5月号的《实验医学与医疗》(Experimental and Therapeutic Medicine)杂志。作者总结说，他们的染色方法简单易行，能快速诊断马尔尼菲青霉病、组织胞浆菌病、毛霉菌病和内脏利什曼病。此外，对于那些不可能进行病原体培养和血清检验的病例，该方法对于诊断上述四种疾病具有重要作用。

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广西医科大学