Исследована устойчивость проб кала для обнаружения бактерий

Исследование проб кала из отдаленных географических местоположений на бактерии Clostridium difficile представляет собой проблему из-за перевозки в течение длительных промежутков времени, зачастую при комнатной температуре.

Были опубликованы данные о расхождениях в частоте обнаружения C. difficile при использовании тестов, основанных на амплификации нуклеиновых кислот (nucleic acid amplification test, или NAAT), и исследованиях антигенов, культур микроорганизмов и цитопатического эффекта, что может быть вызвано различиями в содержании микроорганизмов в кале, иногда очень низким при бессимптомном носительстве; определение количества жизнеспособных микроорганизмов C. difficile может быть необходимо для отличия бессимптомной колонизации от истинной болезни.


Микробиологи в Научно-исследовательском центре Св. Бонифация (Виннипег, провинция Манитоба, Канада) оценили влияние хранения при комнатной температуре в сравнении с 4 °C в течение до 72 часов на устойчивость антигена глутаматдегидрогеназы, антигенов токсина А и В, токсигенной культуры бактерий и исследовали цитопатический эффект. Двенадцать диагностических образцов кала, которые были исследованы в день сбора и оказались положительными на токсины C. difficile, использовались для этого исследования. Аликвоты каждого образца кала были сохранены при комнатной температуре и при 4 °C, и исследование проводилось повторно через 24, 48 и 72 часа.

В исследование были включены образцы кала, которые были положительными на присутствие глутаматдегидрогеназы (glutamate dehydrogenase, или GD), что было определено с использованием комплекта C.DIFF QUIK CHEK (компания TECHLAB; Блэксберг, штат Виргиния, США), а также были положительными на присутствие токсина А / токсина В при исследовании с помощью комплекта TOX A/B QUIK CHEK компании TECHLAB. Исследования цитопатического эффекта проводились с использованием фибробластов крайней плоти человека (Inter Medico; Маркем, провинция Онтарио, Канада). Осадок после центрифугирования из образца, используемого для исследования цитопатического эффекта, был обработан и использовался для выполнения посева Clostridium difficile на агар с моксалактамом и норфлоксацином (Oxoid Company; Непеан, провинция Онтарио, Канада). Исследования антигена глутаматдегидрогеназы и токсигенной культуры бактерий кала, как было показано, были на 100% воспроизводимы при комнатной температуре и при 4 °C в течение 72 часов. Качество определения антигена токсина А и В ухудшилось до 70% через 72 часа при комнатной температуре, но он был воспроизводим на 90% при хранении при 4 °C. Исследование цитопатического эффекта было на 90% воспроизводимо в течение 72 часов при комнатной температуре и при 4 °C.

Авторы пришли к заключению, что если образцы кала хранятся при комнатной температуре, проба на антиген токсина А/В устойчива только в течение 48 часов, и через 72 часа чувствительность снижается до 70%. Для образцов кала, полученных из отдаленных географических местоположений, когда транспортировка осуществляется при комнатной температуре и может составлять до 72 часов, рекомендуется использовать комбинацию скрининговых исследований на антиген GD, объединенную с NAAT, чтобы гарантировать оптимальную чувствительность. Исследование было опубликовано 30 июня 2014 года в журнале Journal of Medical Microbiology & Diagnosis.


Ссылки по теме:
St. Boniface Research Center
TECHLAB
Inter Medico