Определено количественное значение биомаркера церебральной формы малярии

Проведено исследование, затрагивающее обнаружение, полуколичественный анализ и применение в клинической практике Plasmodium falciparum гистидин-обогащенного протеина-2 (PfHRP-2) в качестве биомаркера паразитарного антигена церебральной малярии.

Исследование цереброспинальной жидкости (ЦСЖ) в случаях церебральной формы малярии, как правило, показывает нормальные параметры с нормальным белком, глюкозой и низким уровнем содержания клеток, и до настоящего времени биомаркер ЦСЖ для церебральной формы малярии должен всё же быть идентифицирован.


Международная команда ученых во главе с коллегами из Блумбергской школы здравоохранения имени Джона Хопкинса (Балтимор, штат Мэриленд, США) собрала 73 образца ЦСЖ танзанийских детей в возрасте от 6 месяцев до 9 лет, в крови которых отмечалось содержание паразитов P. falciparum. Образцы ЦСЖ девяти танзанийских детей, у которых микроскопическое исследование периферической крови на P. falciparum показало отрицательный результат, были также собраны на том же самом месте в период с 1994 по 1995 год. Еще 24 образца ЦСЖ были отобраны из заархивированных образцов ЦСЖ, полученных от пациентов с нейроиммунологическими или нейровоспалительными заболеваниями, чтобы использовать их в качестве контрольных образцов.

Диагностический экспресс-тест Binax NOW Malaria Test (компания Alere; Уолтэм, штат Массачусетс, США), который позволяет обнаружить и PfHRP-2, и разновидности альдолазы, был выполнен на образцах ЦСЖ. Иммуно-ПЦР подверглась оптимизации, и процессы амплификации ПЦР в режиме реального времени были выполнены на платформе C1000 Thermal Cycler (компания Bio-Rad; Геркулес, штат Калифорния, США). Для сравнения нескольких образцов плазмы крови и ЦСЖ был проведен иммуноблоттинг.

PfHRP-2 был обнаружен в архивных образцах ЦСЖ больных церебральной формой малярии из Танзании с помощью двух методов: недавно разработанной чувствительной и специфичной иммуно-ПЦР в 72 из 73 образцов и с использованием диагностических экспресс-тестов в 62 из 73 образцов. Среднее геометрическое концентраций PfHRP-2 ЦСЖ составляло 8,76 нг/мл без существенных различий у тех, кто выжил с 9,2 нг/мл, тех, кто умер с 11,1 нг/мл и тех, у кого наблюдались неврологические осложнения с 10,8 нг/мл. Церебральный биомаркер PfHRP-2 ЦСЖ оказался необнаруженным во всех не зараженных паразитами эндемических и неэндемических контрольных образцах.

Авторы пришли к заключению, что широко используемые диагностические экспресс-тесты для выявления малярии могут быть полезными для обнаружения PfHRP-2 ЦСЖ у пациентов с церебральной малярией. Если для диагностического экспресс-теста использовать 100 мкл образца, то в общей сложности в 62 из 73 образцов обнаруживаемая концентрация PfHRP-2 была, по крайней мере, 1 нг/мл – значительно большая величина предела порога обнаружения в 100 пг. PfHRP-2 ЦСЖ пропорционален плазме крови таким образом, что обнаружение в ЦСЖ является отражением повышения PfHRP-2 в плазме или цельной крови, что замечено во многих исследованиях церебральной малярии. Исследование было опубликовано 30 июня 2014 года в “Американском журнале тропической медицины и гигиены”.

Ссылки по теме:
Johns Hopkins Bloomberg School of Public Health
Alere
Bio-Rad