疟疾的分子诊断工具之评估

By LabMedica International staff writers
Posted on 25 Mar 2014

光诱导电子转移荧光引物(PET)实时聚合酶链反应(PCR)日前开发成功，研究人员调查了它诊断疟疾的潜力。

准确诊断疟疾感染仍是一项难题，尤其是识别亚显微级的感染，缺乏资源国家的化验室需要便宜且足够灵敏的分子诊断工具来检测微弱的感染。

图片：Stratagene Mx3000P实时PCR系统（图片蒙安捷伦惠赐）。

美国佐治亚大学的科学家与东非的同行合作，从坦桑尼亚伊林加地区开展的一项抽样调查中获得了303份血样。为每份样本准备浓涂片和稀涂片，提取DNA并分离。多重PET-PCR测定最初的设计用途是供坦桑尼亚的化验室检测疟原虫属和恶性疟原虫，用该测定筛查所有样本，然后在美国疾病控制与预防中心(CDC; Atlanta, GA, USA)的参考实验室重测一遍。

以单盲方式测试一部分样本，确定PET-PCR相对于巢式18S核糖体核糖核酸(rRNA) PCR的灵敏度和特异性。在坦桑尼亚的Ifakara卫生研究所(www.ihi.or.tz)和美国CDC用安捷伦公司(Santa Clara, CA, USA)的Stratagene Mx3000P实时PCR系统检验所有样本。

在两所实验室用PET-PCR共检验了303份样本，其中的27份对恶性疟原虫和疟原虫属都呈阳性。显微镜检测到其中有11份(3.63%)阳性样本，这些阳性样本得到了PET-PCR的证实。此外，PET-PCR发现16份显微镜检阴性的样本对恶性疟原虫和疟原虫属都呈阳性。数据显示PET-PCR测定的灵敏度和特异性均为100%，显微镜检的灵敏度为40%，特异性为100%。

随着目标转向消灭疟疾，需要更新的适合大规模筛查的工具来检测所有的疟疾病例，包括显微镜或快速诊断检验(RDT)检不出的微弱感染。该研究的论文发表于2014年1月27日的《疟疾杂志》(Malaria Journal)。作者总结说，PET-PCR作为一种新型分子诊断工具的性能特点类似于常用的PCR方法，但更便宜，更容易使用，且适于发展中国家的大规模监测检查。

Related Links:
佐治亚大学
安捷伦公司
Ifakara卫生研究所
美国疾病控制与预防中心