确定免疫应答的突破性技术

By LabMedica International staff writers
Posted on 26 Jan 2016

为治疗数种疾病（包括癌症）而确定免疫应答和防治T细胞功能的特征，能鉴别和计数抗原特异性T细胞的检测方法是关键性工具。
新开发出一种结合常规免疫监测技术和免疫受体组库测序的多重方法，能够同时鉴别出大量抗原的特异性T细胞。

图片：T淋巴细胞（粉色）的彩色扫描电子显微照片，通过T细胞受体识别肿瘤细胞的抗原（黄色）（照片由Steve Gschmeissner提供）。

Adaptive Biotechnologies（South San Francisco，CA，USA）的科研人员对5名T细胞低至百万分之一情况的患者进行了多重30种不同抗原检测，并鉴别出427个抗原特异性克隆型。克隆型鉴别结果得到多种途径的验证，包括重复性、与已发表克隆型的一致性和与酶联免疫斑点技术（ELISPOT）的高度相关性。
使用下列两种方法之一鉴别抗原特异性T细胞：与多肽混合物孵化过夜后进行dextramer结合或CD137上调。Dextramer特异性T细胞被孵化外周血单核细胞（PBMC）识别，结合了8个dextramer。新检测方法被称为MIRA，用于T细胞受体抗原特异性多重鉴别。
四种抗原的ELISPOT结果由各自的供体独立生成。ELISPOT检测分泌特定细胞因子的抗原特异性T细胞总量。如果ELISPOT检测出所有抗原特异性T细胞分泌的细胞因子，则结果将类似于MIRA鉴别出的抗原特异性克隆型总频次。研究人员比较了IFN-γ ELISPOT结果和各自供体的抗原特异性基因型总频次。两种检测结果有高度相关性，并且MIRA很容易鉴别出低于1/100000 PBMC的抗原特异性克隆型，低于估计的ELISPOT检测限约4点/100000 PBMC。
Adaptive Biotechnologies的首席科学家和共同创立者，Harlan Robins博士说明，“使用这种新的多重技术，我们现在能够将大量抗原特异性分配给T细胞受体（TCR）序列。联合我们的一流技术——高通量配对TCR α和β链序列，我们现在拥有了有效鉴别功能性免疫受体所需的工具，能够令生物标志物的发现和治疗效果大幅改善。”本研究已发表于2015年10月28日刊的Public Library of Science ONE（公共科学图书馆•综合）。

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