Проточная цитометрия способна одновременно обнаруживать иммунные комплексы, прикрепленные к эритроцитам

Иммунные комплексы, прикрепленные к мембране эритроцита, участвуют в патогенезе аутоиммунной гемолитической анемии, и в настоящее время прямой антиглобулиновый тест используется для диагностики аутоиммунной гемолитической анемии, однако его результаты могут отличаться.

Проточная цитометрия позволяет проводить анализ многочисленных параметров и одновременное обнаружение, что было бы полезно для диагностики аутоиммунной гемолитической анемии и могло бы помочь объяснить некоторые механизмы течения патологического процесса этого заболевания, включая потерю эритоцитов, что является причиной функционального нарушения аэробного обмена веществ, вызывая гипоксию, повреждение тканей и некроз, которые могут привести к полиорганной недостаточности.


Ученые из Андского университета (Universidad de los Andes; Богота, Колумбия) выполнили исследование, в котором приняли участие в общей сложности 24 человека, разделенных на три группы. Контрольная группа составляла 10 клинически здоровых добровольцев, не страдающих анемией или другими системными заболеваниями; еще 5 пациентов контрольной группы обладали патологиями (опухоль или аутоиммунные заболевания), которые делали их предрасположенными к аутоиммунной гемолитической анемии; в третьей группе участвовали 9 пациентов с диагнозом аутоиммунной гемолитической анемии. Исследование было проведено между 2011 и 2013 годами, и возраст участников исследования составлял от 18 до 75 лет.

Команда ученых стандартизировала процедуру проведения оценки по отдельности или одновременно иммунных комплексов иммуноглобулина класса G (IgG), IgM, IgA и фрагмента компонента комплемента C3d, которые были обнаружены с использованием вторичных антител. Разработанный рабочий стандарт был применен к образцам крови пациентов с аутоиммунной гемолитической анемией, людям, находящимся в группе риска развития данного заболевания, и клинически здоровым участникам исследования контрольной группы. Как минимум 2 × 104 клеток были зарегистрированы цитометром FACSCanto II (Компания BD Bioscience; Сан-Хосе, штат Калифорния, США) при пропуске популяции эритроцитов.

В группе пациентов с диагнозом аутоиммунной гемолитической анемии все участники имели положительный результат на наличие C3d, семь – на наличие IgG, четыре – на наличие IgA, и один – на наличие IgM. Два пациента с диагнозом аутоиммунной гемолитической анемии, которые имели отрицательный результат прямого антиглобулинового теста на присутствие IgG и C3d, получили положительный результат на наличие C3d методом проточной цитометрии. Уровни гемоглобина и гематокрита были ниже у пациентов, страдающих аутоиммунной гемолитической анемией, по сравнению с другими группами. Не было обнаружено никаких различий между уровнями гемоглобина и гематокрита у здоровых доноров и пациентов, предрасположенных к аутоиммунной гемолитической анемии.

Авторы пришли к заключению, что проточная цитометрия представляет собой последовательный метод для идентификации присутствия иммунных комплексов IgG, IgM, IgA и C3d, прикрепленных к эритроцитам, и может быть полезной для понимания механизмов, участвующих в патогенезе аутоиммунной гемолитической анемии. Исследование было опубликовано в “Международном журнале лабораторной гематологии”, номер за июнь 2015 года.

Ссылки по теме:
Universidad de los Andes
BD Bioscience