Проточная цитометрия обнаруживает миелодисплазию в периферической крови

Миелодиспластические синдромы (МДС, myelodysplastic syndromes - MDS) представляют собой группу миелоидных новообразований, характеризующихся неэффективным гемопоэзом, цитопениями периферической крови (ПК) и высоким риском развития лейкемии.

Диагноз МДС обычно основан на морфологических и цитогенетических нарушениях, таких как наличие цитопении, бласты в периферической крови и/или костном мозге (КМ) и дисплазия в одном или нескольких последовательностях поколениях гематопоэтических клеток. Хотя цитоморфологические данные периферической крови предоставляют информацию для подозрения на МДС, в настоящее время для подтверждения диагноза принимаются только исследования костного мозга.


Ученые, в сотрудничестве с больницей Санту Антонио в Порто (Hospital de Santo António Porto; Порту, Португалия), изучили 14 пациентов с МДС низкого риска (low-risk MDS - LR-MDS), 8 мужчин и 6 женщин в возрасте от 66 до 88 лет (средний возраст – 76 лет), у которых был зарегистрирован по крайней мере один визит в больницу с сентября 2015 года по ноябрь 2015 года. Одновременно было изучено равное количество здоровых доноров крови, 8 мужчин и 6 женщин в возрасте от 19 до 63 лет (средний возраст - 55 лет).

Клинические и лабораторные данные были ретроспективно собраны из больничных записей. Образцы аспирата костного мозга использовались для подготовки мазков КМ. Они были окрашены по Лейшману, а морфология клеток анализировалась с помощью обычной оптической микроскопии. Исследования цитогенетики проводились на аспиратах КМ либо с помощью обычной цитогенетики, либо с помощью флуоресцентной гибридизации in situ (FISH).

Образцы периферической крови были собраны в пробирки, содержащие трикалиевую соль этилендиаминтетрауксусной кислоты, и обработаны в течение 24 часов после сбора. Клеточное иммунофенотипирование выполнялось с помощью 8-цветной проточной цитометрии с использованием меченных флуоресцеином моноклональных антител (mAb) с различными специфическими свойствами. Получение образцов было проведено в проточном цитометре BD FACSCanto II.

Команда обнаружила, что нейтрофилы периферической крови у пациентов с LR-MDS часто имели низкие значения прямого светорассеяния и бокового светорассеяния и низкие уровни экспрессии CD11b, CD11c, CD10, CD16, CD13 и CD45 в указанном порядке, по сравнению с нормальными нейтрофилами. Кроме того, пациенты с LR-MDS обычно демонстрируют более высокую фракцию CD14+CD56+ и более низкую фракцию CD14+CD16+ моноцитов в ПК. Показатель иммунофенотипирования основывался на том, какие образцы ПК у пациентов с LR-MDS можно отличить от обычных образцов ПК с чувствительностью 93% и специфичностью 100%.

Авторы пришли к выводу, что их экспериментальное исследование выявило измененный нейтрофильный иммунофенотип, часто сопровождающийся аномальным иммунофенотипом моноцитов в ПК почти из всех случаев LR-MDS; предполагается, что оценка аномальной экспрессии антигена в зрелых миелоидных клетках ПК может помочь идентифицировать пациентов с LR-MDS. После перевода в простую шкалу на основе проточной цитометрии и преобразования в визуальную аналоговую шкалу (MDS thermometer) эти результаты могут быть легко применены в клинической практике. Исследование было опубликовано 13 марта 2018 года в журнале BMC Hematology.

Ссылки по теме:
Больница Санту Антонио в Порто