Анализ крови позволяет улучшить лечение острого миелобластного лейкоза

Разработан простой анализ крови, который способен обнаруживать остаточные уровни лейкозных клеток, сохранившихся после интенсивной химиотерапии. Анализ может дать прогноз, кто из пациентов с острым миелобластным лейкозом подвержен риску повторения заболевания в будущем, и это поможет ориентировать врачей на принятие дальнейших решений о лечении.

Острый миелобластный лейкоз представляет собой тип рака крови, который диагностируют приблизительно у 2,400 человек каждый год в Великобритании, при этом пятилетняя выживаемость чрезвычайно низка: в живых остается меньше 2 из 10 пациентов. Лейкоз может быть вылечен у пациентов, которые в состоянии вынести интенсивное лечение, при этом прогноз у таких пациентов лучше.


Многочисленная команда ученых во главе с коллегами из Национального института исследований в области здравоохранения Великобритании (Лондон, Великобритания) провела с 6 апреля 2009 года по 31 декабря 2014 года исследование пациентов. Централизованный молекулярный скрининг позволил определить пациентов с мутациями в гене нуклеофосмина ( nucleophosmin, NPM1). Последующие образцы планировалось получать во время восстановления формулы крови после каждого цикла лечения и затем ежеквартально вплоть до 24 месяцев после консолидации ремиссии. Образцы, которые были получены в начальные моменты времени (т.е. во время восстановления после циклов индукции и консолидации), представляли собой преимущественно образцы периферической крови, так как для оценки костного мозга предпочтение было отдано проточной цитометрии.

Команда ученых определила минимальную остаточную болезнь при выполнении количественной полимеразной цепной реакции (ПЦР) с обратной транскриптазой, используя специфический праймер для обнаружения мутации со стандартным праймером и зондом. Анализы были выполнены в трёх параллельных подходах на платформе ABI 7900 (компания Applied Biosystems; Фостер-Сити, штат Калифорния, США), и уровни мутировавших транскриптов сравнили с экспрессией референсного гена с помощью плазмидных стандартов и метода определения разности значений пороговых циклов, используемого для редких мутаций. Высокопроизводительное секвенирование с применением набора HaloPlex Target Enrichment (компания Agilent Technologies; Санта-Клара, штат Калифорния, США) было выполнено на системе HiSeq 2000 (Компания Illumina; Сан-Диего, штат Калифорния, США).

Ученые обнаружили, что показатели при исследовании минимальной остаточной болезни были намного лучше при прогнозировании рецидива по сравнению с существующими методами, которые в основном учитывают генетические аномалии в пределах раковых клеток, влияющие на то, представляют они “высокий риск” или “низкий риск” у отдельных пациентов в начале лечения. Исследование минимальной остаточной болезни позволяет определить, находится ли пациент в состоянии “молекулярной ремиссии”, когда ничто не указывает на наличие дефектных генов, являющихся признаком присутствия лейкозных клеток в крови пациентов. Пациенты заболевали повторно в течение трех лет в 82% случаев, в которых исследование минимальной остаточной болезни обнаружило присутствие гена NPM1 в образце крови, взятом после первоначального лечения. Только у 30% пациентов, у которых не было поддающихся обнаружению лейкозных клеток в крови на данном этапе, случался рецидив в течение того же промежутка времени.

Дэвид Гримвэйд (David Grimwade), доктор философии, преподаватель и ведущий руководитель исследования, сказал: “Обычные методы для ведения лечения этого типа лейкемии являются неудовлетворительными. Исследование минимальной остаточной болезни является бесценным методом для мониторинга эффективности лечения и для определения пациентов, для которых использования химиотерапии не достаточно и которым требуется трансплантация стволовых клеток или новые методы лечения”. Исследование было опубликовано 20 января 2016 года в журнале The New England Journal of Medicine (NEJM).

Ссылки по теме:
UK National Institute for Health Research
Applied Biosystems
Agilent Technologies