Геномные анализы улучшают трансфузионную терапию при серповидно-клеточной анемии

Молекулярные методы, в том числе индивидуальные ДНК-микролинейки, все чаще используются для дополнения серологических методов при предсказании группы крови.

Аллоиммунизация эритроцитов (RBC) групп крови остается главной проблемой в трансфузионной медицине. Пациенты с серповидно-клеточной анемией (sickle cell disease - SCD) подвергаются наиболее высокому риску развития аллоантител к антигенам RBC, по сравнению с другими пациентами при множественном переливании крови.


Иммунологи в Центре крови Нью-Йорка (штат Нью-Йорк, США) и их коллеги из детской больницы и исследовательского центра Окленда (штат Калифорния, США) определили разнообразие и частоту аллелей Rh у афро-американцев, чтобы оценить производительность ДНК-микролинейки для их детерминации. Классическим методом, который используется для проверки на антигены групп крови, является гемагглютинация, но, в зависимости от методов типирования и реагентов, она может привести к расхождениям, которые исключают интерпретацию на основе одной только серологической реактивности.

Ученые проверили два набора образцов: людей с известными вариантами типов резуса и случайно выбранных афро-американских доноров и пациентов с SCD. Стандартные тесты гемагглютинации были использованы для создания фенотипов резуса. Для прогнозирования генотипа были использованы анализы на основе комплементарной (кДНК) и геномной ДНК (гДНК), включая секвенирование, полимеразную цепную реакцию и полиморфизм длин рестрикционных фрагментов (ПЦР-ПДРФ), а также микролинейки с наборами для анализа индивидуальных резус-групп с D-резус-антигеном (RHD) и резус-групп с антигенами CcEe (RHCE).

В 829 образцах ученые определили 1658 аллелей с 72 различными аллелями, 40 RHD и 32 RHCE, 22 из которых были новыми. ДНК-микролинейки обнаружили все исследованные нуклеотиды, что позволяет характеризовать более чем 900 аллелей. Платформы тестирования ДНК с высокой пропускной способностью представляют средства для проверки относительно большого числа доноров и потенциально способны предотвратить иммунизацию путем изменения способа, которым антиген-отрицательная кровь переливается пациентам.

Авторы пришли к выводу, что из-за высокого аллельного резусного разнообразия, обнаруженного у в афро-американского населения, для определения точного фенотипа резуса часто требуется анализ ДНК в сочетании с серологическими тестами. Аллель-специфические микролинейки предлагают средства для определения резус-принадлежности донора с высокой пропускной способностью и служат в качестве ценного дополнения к серологическим методам по предсказанию резус-принадлежности. Новое поколение секвенирования имеет большой потенциал, чтобы точно охарактеризовать фенотипы группы крови и улучшить клинический курс многократного переливания крови пациентам с серповидно-клеточной анемией. Исследование было опубликовано 2 декабря 2103 в журнале "Кровяные клетки, молекулы и болезни" (Blood Cells, Molecules, and Diseases).

Ссылки по теме:
Центр крови Нью-Йорка
Детская больница и исследовательский центр Окленда