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用自动血液分析仪计数外周血中的干细胞

By LabMedica International staff writers
Posted on 27 Jan 2014
CD34+细胞一般作为造血细胞存在于脐带和骨髓里,CD34+细胞分化群的注入数量对于外周血干细胞移植(PBSCT)的成功至关重要。

虽然计数CD34+细胞的能力现在只取决于流式细胞术分析,但操作的复杂性和试剂(包括单克隆抗体)的成本是主要的不利之处,用一台自动血液分析仪可以克服这些缺点。

图片:XN-2000系列型号的自动血液分析仪(图片蒙Sysmex公司惠赐)。
图片:XN-2000系列型号的自动血液分析仪(图片蒙Sysmex公司惠赐)。

位于东京的日本国家癌症中心医院的科学家提出了一种新颖的方法,它基于溶血和化学染色,然后进行基于流式细胞术的光学检测,所用的是一台自动血液分析仪。科学家们从18名健康献血者和6名接受自体移植PBSCT的患者身上取得76份粒细胞集落刺激因子(G-CSF)动员的血样或单采样本,比较了表达CD34+的细胞和造血祖细胞(HPC)。

用日本神户Sysmex公司新发布的XN系列型号自动血液分析仪测量HPC。XN系列型号装备了白细胞前体细胞(WPC)通道,可检测未成熟细胞,如成髓细胞和异常淋巴细胞。这条通道的测量原理利用了光学检测系统和通用流式细胞术。这条通道用了两种试剂:含聚氧乙烯非离子型表面活性剂的溶解试剂和含聚甲炔染料的染色试剂。用Miltenyi Biotec公司(Bergisch Gladbach, Germany)的MACS磁细胞分离试剂盒分离CD34+细胞。

研究人员发现,HPC数量和CD34+细胞数量之间有密切关联。根据机采前外周血(PB)或机采中间产物里的HPC估算最终产物里的HPC总数量,它也与最终产物里的CD34+细胞总数密切相关。PB里HPC的变化极其类似于动员过程中CD34+细胞的变化。用免疫磁珠进行的研究表明,大多数CD34+细胞存在于HPC中,反之亦然。

该研究的论文发表于2013年12月27日的《国际血液化验杂志》(International Journal of Laboratory Hematology)。作者总结说,在XN系列自动血液分析仪上无需使用单克隆抗体就能执行他们的新型HPC计数方法。根据最终产物里以及机采前外周血和机采过程中间产物里的HPC的总数可预测所采集的CD34+细胞的总数量。HPC还可作为外周血干细胞采集最佳时机的良好指标。

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