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检测血清中骨碱性磷酸酶活性的方法之比较

By LabMedica International staff writers
Posted on 01 Sep 2016
血清中的骨碱性磷酸酶是骨骼形成与新陈代谢,然而,现行的测量方法有局限性,准确性尚不得而知。

碱性磷酸酶(ALP)同工酶已被诊所用作肝病和骨病的生物标记物,测量血清中ALP同工酶的活性在区别诊断和分析某些疾病方面具有高度临床价值。

图片:Access 2免疫测定系统(图片蒙贝克曼库尔特公司惠赐)。
图片:Access 2免疫测定系统(图片蒙贝克曼库尔特公司惠赐)。

日本滨松大学医学院的科学家用电泳和化学发光酶免疫测定(CLEIA)这两种方法测量了127名肝病患者血清中的骨ALP活性。其中52名患者有原发性胆汁性肝硬化,八人有胆汁淤积性肝硬化,13人有胆汁淤积性肝功能障碍,其余人的诊断结果是其它肝病。

科研小组分析ALP同工酶用的是Helena Labs公司(Beaumont, TX, USA)的琼脂糖凝胶电泳产品Quick Gel ALP与Quick ALP试剂。为了彻底分离肝型与骨型ALP,用神经氨酸苷酶预处理样本。此外,用蛋白酶预处理样本,分离骨型与肠型。通过密度测量法取波长为570纳米扫描电泳带。ALP同工酶活性的单位用U/L表示,还以ALP总活性的百分比表示。

这项研究采用了一步式免疫酶测定。使用贝克曼库尔特公司(Brea, CA, USA)的自动化学发光酶免疫测定设备以及一只特制的ALP (BAP)试剂盒。用日本东京日立公司的Labospect 008化学分析仪对血清样本进行基本的生化检查。

研究人员发现,当ALP3同工酶的值较高时,两种方法表现出良好的相关性。然而,随着ALP3百分比水平的降低,相关系数(R)也减小。从ALP3 (%)小于23%开始,R值明显降至0.5以下。五个例外表现出较低的ALP3 (%)活性水平。再者,不同性别的总胆固醇(TC)、γ-谷氨酰转移酶(γ-GTP)、ALP和ALP3 (%)水平显著不同。

该研究的论文发表于2016年6月9日的《Clinica Chimica Acta》杂志。作者总结说,他们的研究表明,对于全ALP和骨型ALP占主导(ALP2%小于等于ALP3%)样本,电泳和CLEIA方法显示出良好的相关性。然而,在有些情况下需要评估电泳的准确性。

Related Links:
滨松大学医学院
贝克曼库尔特公司
日立公司



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